3、最后深入講解小球藻的培養(yǎng)與應(yīng)用以及鑒別方法。 注:互動交流部分感興趣的朋友們請點(diǎn)擊【閱讀原文】進(jìn)行查閱吧 1、藻類的分類-------藻類通常分為11大類 藻類的種類很多,通常有些藻類對水產(chǎn)養(yǎng)殖來說是有益藻類,而有些藻類對水產(chǎn)養(yǎng)殖來說是有害藻類,但是有益藻類與有害藻類不是絕對的,而是相對的。 如綠藻類里面的小球藻、柵列藻、卵囊藻都是目前大量培養(yǎng)的藻類,而水綿、剛毛藻也是綠藻類的藻類,但它屬于青苔類,對養(yǎng)殖來說是有害藻類。 又如藍(lán)藻類,大家一談到藍(lán)藻類的藻類都很恐慌,怕它大量繁殖產(chǎn)生危害,但藍(lán)藻類中的藻類也不全是有害種類,而有些藻類是有益藻類,如說螺旋藻。 所以不能根據(jù)某一大類就斷定這些藻類是有益和有害,而是要根據(jù)具體的種類和數(shù)量來判斷,這就需要在顯微鏡下面鏡檢,首先介紹一下藻類的基本概念。 2、藻類的基本概念 藻類在顯微鏡下能夠觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)屬于微藻,主要有8大藻類,即綠藻類、硅藻類、藍(lán)藻類、裸藻類、甲藻類、黃藻類、隱藻類和金藻類。藻類是沒有胚胎,有葉綠素自養(yǎng)無根莖葉分化的葉狀體孢子植物。 我們?nèi)绾斡^察這些藻類呢? 3、藻類的宏觀特征: ①第一是看水色。 通常一種顏色的水,并不是一種藻類,綠顏色的水它有綠藻,還有裸藻;黃顏色的水有金藻、甲藻、黃藻、硅藻;紅顏色的水有血紅裸藻、甲藻、殼蟲藻、席藻;藍(lán)顏色的水有微囊藻、魚腥藻。我們單純從水色來判斷這個藻相好不好是不科學(xué)的。 ②第二個判斷的標(biāo)準(zhǔn)看水華現(xiàn)象。 水華有溶液狀(硅藻、綠球藻等非鞭毛藻)、云霧狀(隱藻、扁藻等鞭毛藻)、膜狀(微囊藻、魚腥藻等帶偽空泡)、塊狀(實(shí)球藻、團(tuán)藻),這些宏觀現(xiàn)象包含有不同的藻類,所以根據(jù)水華現(xiàn)象不能準(zhǔn)確的判斷藻類到底是哪一種。 ③第三個判斷的標(biāo)準(zhǔn)用手觸摸,每種觸摸的感覺不一樣,它所含的藻類的品種也不一樣。比如不粘手不發(fā)粘的有可能是微囊藻和實(shí)球藻,沾手不易清洗的可能是魚腥藻和綠裸藻,光滑的可能是水綿,粗糙和發(fā)澀的可能是剛毛藻。 ④第四個判斷標(biāo)準(zhǔn)用鼻子聞,聞水的味道,有刺鼻嗆味可能是微囊藻或者其它種藻類。 以上都是可以用眼睛看,用手可以摸等宏觀的一些標(biāo)準(zhǔn),但不能僅從宏觀上判斷某種藻類,而是要根據(jù)它的微觀鏡檢結(jié)構(gòu)進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷。 4、藻類的鏡下結(jié)構(gòu) 藻類結(jié)構(gòu)包含細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。 細(xì)胞壁通常有2種情況,一種是沒有細(xì)胞壁,另一種是有細(xì)胞壁。圖中的裸藻沒有細(xì)胞壁,圖中的硅藻就有細(xì)胞壁。 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有色素、色素體、同化產(chǎn)物和鞭毛。 色素成分的不同有葉綠素使得藻類呈綠色、黃色素使得藻類成黃色、藻膽素使得藻類成藍(lán)色或紅色。 通常能夠看到不同顏色的水,就是由于它色素的不同,使得水的顏色的不同。所以從宏觀上看水色的不同只能是初步判斷大致是哪幾種藻類,但是不能準(zhǔn)確判斷它具體是哪種藻類,而要在顯微鏡下看,通過檢查細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、從細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)里面的特征來觀察鑒別它是哪種藻類。 藻類由于它個體比較小,通常鏡檢的時候,用目鏡是10×和16×的兩種,物鏡是有4×、10×、40×、100×,也就是放大倍數(shù)最大640倍就可以了,而不用油鏡的100×鏡頭。 5、細(xì)胞形態(tài)與體制 藻類的形態(tài)多種多樣,每種藻類的形態(tài)不一樣,它的結(jié)構(gòu)也是不一樣的,要從它的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核以及細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)來判斷。 藻類有單細(xì)胞、單細(xì)胞群體和多細(xì)胞。在顯微鏡下藻類形態(tài)多種多樣,要對照圖譜鑒別每種藻類,而不能僅從宏觀上判斷是哪種藻類。 這就是我講的藻類的基本概述,給大家講一個概念性的東西。詳細(xì)知道有很多問題,以后我們可以再進(jìn)一步交流。 下面涉及到我們的話題,小球藻的培養(yǎng)和應(yīng)用的問題。首先介紹小球藻的生物學(xué) 小球藻是一種單細(xì)胞綠藻,屬于綠藻門、綠藻綱、綠球藻目、小球藻科、小球藻屬,常培養(yǎng)的有:蛋白核小球藻、橢圓小球藻、普通小球藻三種。市面上大家經(jīng)常見到的小球藻多數(shù)是蛋白核小球藻和橢圓小球藻。蛋白核小球藻因?yàn)榈鞍缀勘容^高,一般可以作為飼料,同時也可以作為一種調(diào)水劑。實(shí)驗(yàn)研究蛋白核小球藻在高溫季節(jié)不是很穩(wěn)定,橢圓小球藻相比蛋白核小球藻在高溫季節(jié)要穩(wěn)定一些。 小球藻在自然水體里面有很多,它可以生活在淡水或半咸水和海水里面。淡水的種類通常是在肥沃的自然水體和潮濕的土壤中,現(xiàn)在大規(guī)模的培養(yǎng)已經(jīng)成功。 小球藻是單細(xì)胞藻類,小型(2-12um)
蛋白核小球藻是均勻、綠色的液體(第一幅圖),把它放到池塘外進(jìn)行擴(kuò)培,要看池塘內(nèi)的條件,如果池塘里面有大量的原生動物、輪蟲、枝角類。首先要對池塘進(jìn)行處理,不然小球藻下到池塘里面,就會被這些大型的動物吃掉。 現(xiàn)在市面上有很多小球藻在出售,小球藻倒入池塘,能否擴(kuò)培成功是一個很關(guān)鍵性的問題。 ①首先,產(chǎn)品本身是小球藻的種類,數(shù)量要足夠,活性足夠強(qiáng)。 ②第二池塘水質(zhì)的條件符合小球藻生長,還必須要有它的適當(dāng)?shù)姆柿稀?/strong>就像我們種莊稼,種子撒上了,如果沒有肥料也不可能生長得很好,小球藻也是同樣的。一個小球藻在20個小時內(nèi)能繁殖成4個,它是以4的n次方的速度生長,但是它同時需要有培養(yǎng)基。 ③小球藻在擴(kuò)培的時候它分海水種和淡水種,在鹽度不同的情況下使用的小球藻也不是完全一樣的。淡水種的小球藻放到海水里面,由于它滲透壓的不一致,它繁殖的也不可能好,有的小球藻放到水里面沒繁殖起來就是這個道理。一個朋友拿淡水的小球藻放到海水里,結(jié)果他來問小球藻怎么繁殖不起來呢?是因?yàn)榈男∏蛟宸诺胶K?,由于小球藻在海水的滲透壓和淡水的滲透壓不同,所以小球藻沒能夠繁殖起來。(剛才我講的是三幅圖里面的第二幅圖。) 第三幅圖是室內(nèi)養(yǎng)殖東星斑的一個代表,它是利用小球藻的水進(jìn)行養(yǎng)殖的。 市面上一些廠家生產(chǎn)的小球藻產(chǎn)品 到底哪個品種好與不好,產(chǎn)品質(zhì)量如何?我們不能單從顏色上看,而要拿到顯微鏡下鏡檢,才能夠知道它到底是不是小球藻和它的活性如何。 ①小球藻在鏡檢下通常它是圓的(蛋白核小球藻),它的色素體我們能夠看到,如果它的品質(zhì)好,它的色素沉淀會很好,如果色素沉淀得不好,說明它的活性就不夠好。 我在實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)買了十幾個廠家的產(chǎn)品,有些廠家的產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)室里面根本就繁殖不起來,它看著是綠色的,但是我們進(jìn)行培養(yǎng)的時候培養(yǎng)不出綠色的小球藻,說明它的顏色雖然對了,但它不是小球藻,它可能是其它成分兌出來的。 ②另外還有一些種類它是有小球藻,但他的種類和數(shù)量特別的少,也繁殖不好。小球藻的繁殖是要有一定的條件的。 下面來跟大家說一下小球藻的繁殖到底需要什么樣的條件。 1.小球藻培養(yǎng)的物理?xiàng)l件 蛋白核小球藻、橢圓小球藻都是無性繁殖,細(xì)胞分裂1個分裂4個,每20小時以4的n次方的速度繁殖,繁殖速度非??欤?/p> 適合的溫度是20-36度,隨著溫度的升高,繁殖的速度逐漸加快; pH5.5-8.0,鹽度可以從淡水做到海水,實(shí)驗(yàn)室做到40‰-50‰之間; 光照條件:5000-8000lux。 如何判斷光照強(qiáng)度?我給了一幅圖,圖上用32w的燈進(jìn)行判斷,它的培養(yǎng)距離是30cm、20cm、10cm,當(dāng)它距離10cm就是5000lux。 設(shè)定的培養(yǎng)條件對養(yǎng)藻來說非常非常重要,我們根據(jù)不同地區(qū),從南到北,由于當(dāng)?shù)氐乃|(zhì)條件、環(huán)境條件、溫度的不一樣,培養(yǎng)的結(jié)果都不同。 2、小球藻的生長模式 小球藻的生長模式分為幾個階段,最開始的時候是延緩期,生長速度比較慢,然后進(jìn)入指數(shù)生長期,再進(jìn)行相對生長下降期,最后靜止期和死亡期。 也就是說小球藻剛開始生長是比較緩慢的,它通常在第一天到第二天的時候長速很慢,而在第3天到第4天的時候進(jìn)入了對數(shù)生長期,生長速度就很快,長到一定高峰時期,相對生長速度逐漸下降下來,然后就進(jìn)入了死亡期,也就是說我們在培養(yǎng)藻類的時候如果控制不好進(jìn)入死亡就產(chǎn)生倒藻。 池塘中有時候藻類生長到最旺盛的時候最容易大量的死亡,就是出現(xiàn)了倒藻現(xiàn)象,它就進(jìn)入了最后的時期死亡期。 3、小球藻的培養(yǎng) 小球藻的培養(yǎng)有三級培養(yǎng)。 ①一級培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),藻種分離和藻種保存,通常一級培養(yǎng)是在實(shí)驗(yàn)室做的。 二級培養(yǎng)和三級培養(yǎng)是大家在室內(nèi)外能夠進(jìn)行培養(yǎng)的。 ②二級培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)室外培養(yǎng),需要針對實(shí)驗(yàn)室給出的藻種,摸索好當(dāng)?shù)氐呐囵B(yǎng)條件(水質(zhì)、光照和營養(yǎng)條件)再進(jìn)行。 給出的兩幅圖片,第一幅圖片是實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),第二幅圖片是實(shí)驗(yàn)室外進(jìn)行二級培養(yǎng),在培養(yǎng)的時候也要進(jìn)行消毒、接種、設(shè)置培養(yǎng)條件、培養(yǎng)管理。 ③第三級培養(yǎng)是工廠化的培養(yǎng),大規(guī)模培養(yǎng),這三幅圖分別是跑道池的培養(yǎng)、管道的培養(yǎng)和圓柱形的培養(yǎng),這三種方式都是企業(yè)采用的培養(yǎng)方法。 養(yǎng)殖戶如果想做的話,沒有大型的設(shè)備,可以采用簡易的設(shè)備或者池塘進(jìn)行擴(kuò)培。用塑料袋(苗種的那種塑料袋)或者用買那種大的塑料桶進(jìn)行擴(kuò)培,但是在外面擴(kuò)培的時候一定要注意消毒徹底,不能有其它微生物的進(jìn)入。 4、藻類營養(yǎng)需求 在進(jìn)行培養(yǎng)的時候有了藻種,還需要營養(yǎng),就像人每天要吃飯一樣,藻的培養(yǎng)需要營養(yǎng)。 ①營養(yǎng)成分一定要有碳源,在培養(yǎng)的時候通入空氣,空氣里面含有二氧化碳,通常含有1-5%的二氧化碳。培養(yǎng)基里有碳酸鹽,可以用小蘇打。 ②第二種的營養(yǎng)是氮源,氮源可以是硝酸鹽、氨鹽和尿素,藻類的生長離不開氮元素,一般大多數(shù)單胞藻干物中含有7-9%的氮源。 ③第三種營養(yǎng)是礦物質(zhì),藻類對礦物質(zhì)的利用與植物一樣,但對鈣的吸收比較少,主要的成分是鉀、鎂、鈉、鈣、硫酸鹽和磷酸鹽。 ④在培養(yǎng)藻類的時候,通常把pH值調(diào)到稍微偏酸,避免鈣鎂和其它微量元素發(fā)生沉淀。 ⑤也需要添加一定量的微量元素。 ⑥最后還要添加一定量的維生素,通常有維生素B1和B12,但是維生素的量非常少,如果添加量大也繁殖不起來。 我們在培養(yǎng)藻類的時候,添加營養(yǎng)基的時候要根據(jù)藻類的數(shù)量和種類選擇不同的營養(yǎng)基,而且營養(yǎng)基的量也不一樣,如果量大了,它也可能抑制藻類的生長,量少了也可能供不上藻類的生長,有一定的比例和要求。 5、培養(yǎng)方法 ①首先要選擇合適的培養(yǎng)容器,二級培養(yǎng)通常選擇小型的培養(yǎng)容器,三角錐瓶或者5L或者10L的桶,大規(guī)模培養(yǎng)要選擇大的容器,選好容器后要對容器進(jìn)行消毒。 ②容器工具的消毒,消毒的方法有物理方法和化學(xué)方法 物理方法是通過加熱消毒,加熱消毒可以直接用酒精燈,還可以煮沸消毒。 化學(xué)方法,一般大容器采用化學(xué)方法消毒。常用的化學(xué)藥品有漂白粉、酒精和高錳酸鉀。 ③培養(yǎng)液的配制:自己培養(yǎng)藻類通常配比不好培養(yǎng)基,一般選擇合適廠家的培養(yǎng)基,不同的藻種,去定制培養(yǎng)基。 藻種有了,培養(yǎng)基也配制好了(有賣現(xiàn)成的培養(yǎng)基),就可以做二級培養(yǎng)了。 6、接種 ①藻種質(zhì)量:一般要求選取無敵害生物污染,生活力強(qiáng),生活旺盛的藻種培養(yǎng)。 ②藻種數(shù)量:藻液容量和新配培養(yǎng)液比例為1:2或者1:3,一瓶的藻種可以接3-4瓶的藻量。二級培養(yǎng)和三級培養(yǎng)由于培養(yǎng)容器容量大,藻種供應(yīng)有時不足,可根據(jù)具體情況靈活掌握,但最少不宜低于1:50。一般以1:10-1:20較適宜。如果藻量特別少,繁殖速度就很慢。 ③接種時間:接種的時候要選擇上午的時間,最好在8-10點(diǎn),不適合在晚上接種,晚上接種的成功比較低。 藻種拿到以后,首先要拿出來讓它復(fù)蘇幾個小時,這樣接種效果相對好,接種量控制二級培養(yǎng)(1瓶接3-4瓶)。 7、培養(yǎng)管理: 我們做好了接種,那么就要對所做的培養(yǎng)進(jìn)行管理。 ①要不斷的攪拌和充氣,通過攪拌或充氣增加水和空氣的接觸面,使空氣中二氧化碳溶解到培養(yǎng)液中,補(bǔ)充由于藻細(xì)胞作用對二氧化碳的消耗。幫助沉淀藻細(xì)胞上浮而獲得光照。 防止水表面長出菌膜,攪動、搖動一般每天至少3次,定時進(jìn)行,每次半分鐘,充氣可24小時連續(xù)充氣或間歇充氣。 ②燈光的調(diào)節(jié):極端易變是太陽光源的特點(diǎn),必須根據(jù)天氣情況,不斷調(diào)節(jié)光照度。室內(nèi)盡可能利用近窗口的漫射光,防止直射光照射,光照過強(qiáng)時可用布簾遮光調(diào)節(jié)。室外一般應(yīng)有棚室頂架,用活動白帆布或彩條布蓬調(diào)節(jié)光照,陰雨天,可短期利用人工光照。光線太強(qiáng)對藻類生長不利,光線太弱對藻類生長也不利,要適合的光照,小球藻的適合光照在5000-8000lux,這是我們通過實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)總結(jié)出來的。 ③溫度的管理:小球藻培養(yǎng)溫度最高在36度(海南),也做得非常好,生長速度很快,溫度越高生長速度越快,在溫度比較低的時候生長速度就比較慢,通常小球藻的培養(yǎng)生長周期快的時候4天,慢的時候應(yīng)該在10天左右。 ④注意酸堿度的變化和二氧化碳的進(jìn)入量,pH值太高對藻類生長也不利,pH值太低也不行,1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值。 小球藻的應(yīng)用范圍很多,主要有6個方面: ①溶解氧的主要來源,水里面有85%的氧來自藻類,所以外界的補(bǔ)充包括增氧機(jī)的和增氧藥不是主要的來源。②調(diào)節(jié)水質(zhì)③作為餌料④肥料的應(yīng)用⑤提高養(yǎng)殖動物的抗病能力⑥調(diào)節(jié)藻相,控制有害藻類。 1、溶解氧的主要來源 藻類的光合作用需要二氧化碳和水,在有光照的情況下,產(chǎn)生有機(jī)物,同時釋放出氧氣,所以藻類是水中氧氣的主要來源。藻類在進(jìn)行光合作用的同時也進(jìn)行呼吸作用。藻類產(chǎn)氧是光合作用,呼吸作用耗養(yǎng)。藻類的產(chǎn)氧大于耗氧,就是光合作用大于呼吸作用,只要有藻類的生長,水中的氧氣含量是逐漸增加的,而不是逐漸降低的,除非藻類倒藻,就只有呼吸作用,沒有光合作用。 2、調(diào)節(jié)水質(zhì) 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小球藻對總磷、總氮、氨氮和COD值都有一定的改善,在48h之內(nèi)總,總氮量、總磷量、氨氮量及COD值都逐漸降低。 3、作為餌料 小球藻作為餌料,由于小球藻有一定的蛋白質(zhì)含量和含有一些其他的有益成分,所以小球藻被添加到飼料里面,但是現(xiàn)在小球藻培養(yǎng)的成本比較高,做飼料還是很少,當(dāng)小球藻大規(guī)模生產(chǎn)成本降低,在飼料的應(yīng)用就更為廣泛。 4、肥料的應(yīng)用 小球藻由于含有很多有機(jī)成分,在處理養(yǎng)殖場時培養(yǎng)起來的小球藻被用作為肥料。 5、提高養(yǎng)殖動物的抗病能力 主要是小球藻含有CGF小球藻生長因子,它能夠促進(jìn)組織修復(fù),提高免疫力、抑制病菌的侵染,所以小球藻可以提高養(yǎng)殖品種的抗病能力,同時它的營養(yǎng)成分也比較豐富。 6、可以調(diào)節(jié)藻相,控制有害藻類 在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,常見的有害藻類有藍(lán)藻、裸藻、甲藻、小三毛金藻和青苔。如果把小球藻大量繁殖起來成為優(yōu)勢種,那么這些有害藻類就不能成為水體的優(yōu)勢種,從而抑制有害藻類。今年我們在室外塘做過實(shí)驗(yàn),小球藻配合硅藻類使用,在室外塘有害藻類控制得非常好。小球藻在室內(nèi)培養(yǎng)以后,在室外擴(kuò)種,從海水到淡水,從東北一直到海南都做過實(shí)驗(yàn),成功擴(kuò)培并控制有害藻類。 ①首先從顏色判斷,小球藻顏色是墨綠色、綠色的,但不是絕對的,具體的顏色根據(jù)小球藻的數(shù)量而定。像第一張圖濃度就比較高,濃度在5000-8000萬/ml,第二張圖瓶中顏色比較淡,但它也是小球藻,只是它的濃度比較低。 第二幅圖又兩個瓶子,一個瓶子里面是均勻綠色,另一個是是底下沉淀了。小球藻進(jìn)入休眠狀態(tài)它就會沉淀,它處于生長階段是均勻的,藻液保存時間長了,處于休眠狀態(tài)它就會沉淀。但是小球藻的生存能力特別強(qiáng),只要藻種好,它就不容易死。我們曾做過實(shí)驗(yàn),在室內(nèi)常溫下保存了半年的藻都能正常繁殖的很好。 第三幅圖,就是我們曾經(jīng)買過的一瓶,這瓶樣品已經(jīng)放了兩年了,始終顏色從來沒變過,還是這么均勻透綠。我買了兩瓶,其中一瓶用于繁殖,繁殖兩次都沒有繁殖起來,說明這個不是藻,所以說單從顏色上看我們判斷不出哪個質(zhì)量好哪個質(zhì)量不好,藻類是什么品種。 ②我認(rèn)為比較準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)就是鏡檢,做藻類一定要鏡檢。很多朋友沒有顯微鏡甚至也不會看顯微鏡,就做藻類,你做得好不好怎么判斷呢?沒有一個判斷標(biāo)準(zhǔn)。 小球藻鏡下三幅圖,第一幅圖是小球藻的密度比較大,第二幅圖密度比較小,第三幅圖有集中有分散的,這三幅圖你一看都是小球藻,我們在顯微鏡下看到了小球藻,難道你能說它不是小球藻品種嗎? 所以說判斷小球藻的好與不好,一方面從顏色上看是可以的,但不是絕對的,而要進(jìn)一步進(jìn)行鏡檢,才能判斷出來小球藻到底質(zhì)量如何。 本文為“水產(chǎn)前沿”獨(dú)家稿件,版權(quán)合作,敬請聯(lián)系wx@fishfirst.cn。
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